摘要： 提出了重组毕赤酵母工程菌ｐＰＩＣＺＤＴ３０／ＧＳ１１５基因组中外源基因ＤＴ３０拷贝数的实 时荧光定量ＰＣＲ方法。该重组工程菌用来表达人胰岛素前体（ＰＩＤＴ３０），其表达量的高低、菌种稳定性对工艺研究及整体项目成本等有重大影响。外源基因拷贝数是检测表达量的一个重 要指标。该方法中，利用毕赤酵母的看家基因ＧＡＰ（Ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ３ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ）为内参，分别建立含ＧＡＰ基因和ＤＴ３０基因的双标准曲线。将工程菌基因组进行荧光定量ＰＣＲ，根据标准曲线和Ｃｔ值计算目的基因ＤＴ３０在重组毕赤酵母工程菌中的拷贝数，结果为７个。