摘要： 设计了重组赖氨酸内肽酶蛋白氨基酸序列，根据Ｐ．Ｐａｓｔｏｒｉｓ酵母密码子偏爱性原则设计ｃＤＮＡ序列，其中ＴＧＡ和ＴＡＡ为两个终止密码子序列，并在序列５’端和３’端分别设计ＸｈｏＩ（ＣＴＣＧＡＧ）和ＮｏｔＩ（ＧＣＧＧＣＣＧＣ）限制性酶切位点，将其重组到原核表达质粒ｐＭＤ１９Ｔ 中，得到ｐＭＤ１９ＴＬｙｓＣ，并在毕赤酵母中获得表达。应用ＳＤＳＰＡＧＥ电泳及免疫斑点法检测其表达，ＲＰＨＰＬＣ分析重组赖氨酸内肽酶可以特异性切除赖氨酸基团Ｃ末端的氨基酸残基，证明该重组的赖氨酸内肽酶可替代ＬｙｓｙｌＥｎｄｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ应用于胰岛素的制备工艺中。