摘要： 为了制备特异性识别ＨＰＶ１６Ｅ６蛋白的单克隆抗体，为建立ＨＰＶ早期诊断试剂盒 提供有效试剂，通过细胞融合、间接ＥＬＩＳＡ方法筛选阳性克隆、多次亚克隆得到稳定分泌抗体的 单克隆杂交瘤细胞株，体内诱生法大量制备腹水，过ＵＮＯｓｐｈｅｒｅＳｕＰｒＡＴＭ柱和ＥＮｒｉｃｈＴＭＳＥＣ６５０ 分子筛柱纯化，通过蛋白电泳鉴定其纯度并测定抗体浓度，并采用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法和间接免疫荧 光法验证纯化后ＨＰＶ１６Ｅ６抗体与ＨＰＶ１６型阳性Ｃａｓｋｉ细胞和ＨＰＶ１８型阳性Ｈｅｌａ细胞特异性 结合。建立了亚型为ＩｇＧ２ａ的单克隆ＨＰＶ１６Ｅ６４Ｄ４杂交瘤细胞株，两步纯化后得到纯度较高 的抗体，可特异性识别ＨＰＶ１６型阳性的Ｃａｓｋｉ细胞中的Ｅ６蛋白，不与Ｈｅｌａ细胞反应，为在蛋白 水平上检测ＨＰＶ１６型病毒提供了新手段。