摘要： 采用ＰＣＲ技术扩增ｍＲｕｂｙ２，将其插入原核表达载体ｐＥＴ３０ａ（＋）中，用ｐＥＴ３０ａ （＋）ｍＲｕｂｙ２转化ＢＬ２１（ＤＥ３）并诱导重组蛋白表达，用荧光显微镜及ＳＤＳＰＡＧＥ观察、检测目 标蛋白的表达情况，以Ｎｉ亲和层析技术纯化重组蛋白。结果表明：构建的重组表达菌株经 ＩＰＴＧ诱导后，发酵液颜色随诱导时间延长逐渐转为橙红，离心后的沉淀菌体为深粉红色，在荧 光显微镜下，菌体发出明亮的红色荧光。ＳＤＳＰＡＧＥ检测发现，ＩＰＴＧ诱导５ｈ，重组蛋白表达量 达到峰值。采用Ｎｉ螯合亲和层析技术从发酵菌体中分离出纯度大于８０％的重组蛋白。由此可 见：采用ＤＮＡ重组技术能在原核系统中成功表达ｍＲｕｂｙ２编码的荧光蛋白，该重组蛋白亮度 高、可视性好，能直观呈现实验结果，便于观察相关实验现象、理解并掌握实验原理，非常适合于 生化、分子生物学实验教学。