摘要： 为了实现降钙素原（ＰＣＴ）蛋白在大肠杆菌中高效表达，对ＰＣＴ的编码基因序列进 行优化，通过化学方法合成优化后ＰＣＴ基因，并将其克隆到ｐＥＴ２８ａ（＋）载体中，构建重组质粒 ｐＥＴ２８ａ（＋）／ＰＣＴ，转化到大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）感受细胞中。将ＩＰＴＧ作为诱导剂诱导重组蛋 白的表达，利用Ｈｉｓｔａｇ镍柱纯化ＰＣＴ重组蛋白，并对纯化后的ＰＣＴ重组蛋白进行ＳＤＳＰＡＧＥ电 泳分析以及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定。结果表明：当重组菌株的诱导条件为０．５ｍＭＩＰＴＧ２５℃诱导１２ ｈ时，ＰＣＴ蛋白表达量最高。ＳＤＳＰＡＧＥ电泳显示：纯化所得ＰＣＴ蛋白纯度达到了９０％以上。 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ显示：在１７ＫＤ处有明显的蛋白印迹条带，与预期相符。说明成功实现了在大肠杆 菌中高效表达ＰＣＴ蛋白，为后续开展ＰＣＴ单抗的制备以及检测方法的研究奠定了基础