摘要： 为实现布鲁氏菌Ｏｍｐ１６蛋白在大肠杆菌中的高效表达，根据ＧｅｎＢａｎｋ发表的 Ｏｍｐ１６（登录号为ＪＦ９１８７６０．１）基因序列，在不改变Ｏｍｐ１６蛋白氨基酸序列的情况下，根据大肠 杆菌密码子偏好性优化基因序列，全基因合成Ｏｍｐ１６基因，并将其克隆到ｐＥＴ２８ａ（＋）载体中， 构建重组质粒ｐＥＴ２８ａ（＋）－Ｏｍｐ１６，转化至ＢＬ２１工程菌进行诱导表达，利用Ｈｉｓｔａｇ镍柱纯化 Ｏｍｐ１６重组蛋白，并对纯化后的重组蛋白进行鉴定。结果表明：当重组菌株ｐＥＴ２８ａ（＋） Ｏｍｐ１６／ＢＬ２１（ＤＥ３）诱导条件为３７℃、ＩＰＴＧ浓度为０．５ｍｍｏｌ／Ｌ诱导６ｈ时，Ｏｍｐ１６蛋白表达 量最高；ＳＤＳＰＡＧＥ电泳显示经镍柱纯化后Ｏｍｐ１６蛋白达到了电泳纯，经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析，目 的蛋白具有抗原特异性，在２１ｋｕ处出现阳性条带，与预期蛋白分子大小相符，因此成功在大肠 杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中高效表达出布鲁氏菌Ｏｍｐ１６重组蛋白，为后续单克隆抗体的制备和布鲁氏 菌病的检测试剂的研发提供了参考。