重庆理工大学学报(自然科学) ›› 2022, Vol. 36 ›› Issue (4): 268-273.
赵 静,郭小利,金盛宇
摘要: 真菌的细胞壁由几丁质、葡聚糖等成分构成,几丁质酶在真菌细胞壁的重构过程起到重要作用。分析显示,人类条件致病真菌构巢曲霉的几丁质酶B(Aspergillus nidulans Chitinase, AnChiB)属于糖基水解酶家族18 (glycosyl hydrolases family 18)二型(type II)几丁质水解酶。结构分析显示,AnChiB的N端18个氨基酸残基为信号肽,蛋白质三维结构为由8个α-螺旋和8个β-折叠组成的(β/α)8 TIM桶状结构,催化位点位于第4个β-折叠上;在第7个α-螺旋和β-折叠间存在一个插入序列,与桶状结构形成一条狭长的底物结合沟,底物结构位点延底物结合沟分布。本研究利用大肠杆菌(Escherichia coli)重组表达系统重组表达并纯化了AnChiB。酶学性质分析显示AnChiB能够水解晶体几丁质,最适pH为5。同时表达量分析显示AnChiB在构巢曲霉生长早期表达量升高,并在48 h达到最高峰。本研究表明AnChiB可能参与构巢曲霉生长过程中的细胞壁重构。
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