重庆理工大学学报(自然科学) ›› 2022, Vol. 36 ›› Issue (4): 268-273.

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构巢曲霉几丁质酶 ChiB的结构分析与重组表达

赵 静,郭小利,金盛宇   

  1. 南京师范大学生命科学学院江苏省微生物与功能基因组学重点实验室
  • 发布日期:2022-05-16
  • 作者简介:赵静,女,硕士研究生,主要从事真菌生理生化的研究,E-mail:zimr54@126.com;;*刘中华,男,博士,副教授,主要从事真菌生理生化的研究

  • Published:2022-05-16

摘要: 真菌的细胞壁由几丁质、葡聚糖等成分构成,几丁质酶在真菌细胞壁的重构过程起到重要作用。分析显示,人类条件致病真菌构巢曲霉的几丁质酶B(Aspergillus nidulans Chitinase, AnChiB)属于糖基水解酶家族18 (glycosyl hydrolases family 18)二型(type II)几丁质水解酶。结构分析显示,AnChiB的N端18个氨基酸残基为信号肽,蛋白质三维结构为由8个α-螺旋和8个β-折叠组成的(β/α)8 TIM桶状结构,催化位点位于第4个β-折叠上;在第7个α-螺旋和β-折叠间存在一个插入序列,与桶状结构形成一条狭长的底物结合沟,底物结构位点延底物结合沟分布。本研究利用大肠杆菌(Escherichia coli)重组表达系统重组表达并纯化了AnChiB。酶学性质分析显示AnChiB能够水解晶体几丁质,最适pH为5。同时表达量分析显示AnChiB在构巢曲霉生长早期表达量升高,并在48 h达到最高峰。本研究表明AnChiB可能参与构巢曲霉生长过程中的细胞壁重构。

关键词: 几丁质酶;结构分析;重组表达;

中图分类号: 

  • R379