摘要： 为了制备犬瘟热病毒（ＣＤＶ）核衣壳蛋白（ＮＰ）的单克隆抗体，从而为建立 ＣＤＶ的 诊断方法提供有效试剂。将纯化后的 ＣＤＶ核蛋白作为免疫原注射至 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔中，取 经 ４次长程免疫和 １次加强免疫并达到融合标准的小鼠脾脏刮制成悬液，与小鼠骨髓瘤细胞 （ＳＰ２／０）进行融合制备杂交瘤细胞，利用间接 ＥＬＩＳＡ筛选，并对单抗进行生物特性鉴定。结果 表明：经过筛选后共获得 ２株可持续分泌抗 ＣＤＶＮＰ的单克隆细胞株，以 ３－３Ｇ、１－１０Ｂ命名。 ２株细胞株抗体经效价测定均可达到 １∶２０４８０００；经亚型鉴定，２株杂交瘤细胞均为 ＩｇＧ２型；经 过 ｐｒｏｔｅｉｎＡ柱纯化，抗体纯度达到了 ９０％以上；ＢＣＡ法测得抗体浓度至少达 ２．７８ｍｇ／ｍＬ；通过 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定，制备所得 ＣＤＶＮＰ单克隆抗体与纯化的 ＣＤＶＮＰ抗原在预期的 ６０ｋｄ处有蛋 白免疫印迹条带。该研究制备的单克隆抗体为后续犬瘟热的检测方法的研究奠定了基础。

关键词: 犬瘟热病毒；核衣壳蛋白；单克隆抗体；细胞融合；效价测定

中图分类号: 

• S852.65