重庆理工大学学报（自然科学） ›› 2024, Vol. 38 ›› Issue (8): 285-291.
廖 倩，向梦玲，凌洪权，董春霞，骆 璐，吴胜昔，曾 政
摘要： 制备布鲁氏菌 ＬＰＳ特异性单克隆抗体，为建立布鲁氏菌病血清学及新型免疫传感器检测方法提供有效试剂。将天然提取的布鲁氏菌 ＬＰＳ抗原使用长程免疫法腹腔注射 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经过 ５次常规免疫及 １次加强免疫后，取小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞（ＳＰ２／０）融合，使用间接酶联免疫吸附试验（ｉＥＬＩＳＡ）对杂交瘤细胞进行筛选，并对纯化后的单克隆抗体进行生物特性鉴定。结果表明：筛选出 ３株稳定分泌单抗的阳性细胞株，分别命名为 ２４Ａ、３４Ｅ、５１０Ｂ；经过亚型鉴定，３８Ｅ、２４Ａ为 ＩｇＧ１亚型，５１０Ｂ为 ＩｇＧ２ｂ亚型。将 ５１０Ｂ细胞株使用腹腔注射法制备腹水，并通过 ＰｒｏｔｅｉｎＡ柱纯化腹水。纯化后单抗达到了电泳纯，ＢＣＡ法测定其浓度最高可达 １．４３１８ｍｇ·ｍＬ－１，ＥＬＩＳＡ效价达到 １∶５１２０００，间接 ＥＬＩＳＡ结果显示制备的抗体具有良好的特异性。研究制备的高特异性、高活性的单克隆抗体可为后续布鲁氏菌病特异性诊断技术研究提供参考。
中图分类号:
主管单位：重庆市教育委员会