重庆理工大学学报(自然科学) ›› 2020, Vol. 34 ›› Issue (11): 207-214.doi: 10.3969/j.issn.1674-8425(z).2020.11.028

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代谢工程改造大肠杆菌生产衣康酸

甘晟勋1,2,萧 琦1,刘 欢1,刘军锋1,邓 利1,2,王 芳1   

  1. 1.北京化工大学生命科学与技术学院北京市生物加工过程重点实验室,北京 100029;2.厦门北化生物产业研究院有限公司,福建厦门 361000
  • 收稿日期:2020-04-18 出版日期:2020-12-22 发布日期:2020-12-22
  • 作者简介:甘晟勋,男,硕士研究生,主要从事分子生物学与代谢工程研究,E-mail:1452728741@qq.com;通讯作者邓利,男,博士,教授,主要从事生物化工、酶工程和脂肪酶催化研究,E-mail:dengli@mail.buct.edu.cn。
  • 基金资助:
    国家重点研发计划项目(2017YFB0306904)

  • Received:2020-04-18 Online:2020-12-22 Published:2020-12-22

摘要: 为了构建生长快、培养简便的高产衣康酸工程菌,在表达编码顺乌头酸脱羧酶的cad基因基础上,过表达编码柠檬酸合酶的glt基因,所得重组菌株摇瓶发酵24h产生104mg/L的衣康酸。通过进一步表达ACS基因构建乙酸回补途径,衣康酸含量达到128mg/L,提高17%。外源添加柠檬酸钠和顺乌头酸对衣康酸的合成有明显的促进作用。共表达cad、glt和ACS的工程菌在IPTG诱导后0h加入12g/L柠檬酸钠,18℃摇瓶培养24h,衣康酸的产量达到317mg/L,柠檬酸盐的利用率达到66%,发酵液中仅有少量的乙酸(0.579g/L)积累。研究结果表明:通过衣康酸合成代谢途径的强化和衣康酸前体的适当供给可以有效提高大肠杆菌生产衣康酸的能力。

中图分类号: 

  • TQ921